Current position:Technical Service > Cell-based Assay > 克隆形成
克隆形成
简介

单个细胞在体外增殖6代以上(时间约1周以上),其后代所形成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3 - 1.0mm之间。细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数, 但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖并形成克隆。只有同时具有贴壁和增殖活力的细胞才会形成克隆。

克隆形成率反映细胞的独立生存能力的强弱,用于评价细胞群体依赖性和增殖能力。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强; 二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,直接接种在培养皿中,持续一周以上,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。

特点

克隆形成实验可用于评价不同杀伤因素(药物、基因等)对肿瘤细胞增殖能力或群体依赖性的敏感性,评价细胞在体内成瘤性,癌细胞不一定都可以在体内成瘤,但若体外克隆能力越强,即表明体内成瘤性越强,算是一种模拟体内成瘤的体外实验。

依据采用的培养介质的不同,分为平板克隆和软琼脂克隆两类。

(1)平板克隆形成:细胞培养在培养基中,应用于贴壁的细胞。

将细胞分离成单细胞悬液,在培养皿中接种培养,根据集落形成数量和大小来检测细胞增殖能力和致瘤性。适用于贴壁生长细胞和正常培养的细胞。


平板克隆形成.png

平板克隆形成实验步骤


(2)软琼脂克隆形成:细胞被琼脂糖挂起来,主要应用于悬浮的肿瘤细胞和转化细胞系。

又名非锚定依赖性生长实验,利用软琼脂为培养介质,使细胞在悬浮状态下生长。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖,进而通过软琼脂中形成克隆的能力反映了恶性程度,可用于细胞分化的基础研究和临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。


软琼脂克隆形成.png

软琼脂克隆形成实验步骤

服务流程
优势

吉满生物具有多年的细胞培养、细胞处理以及细胞功能检测的相关经验,可以满足不同处理需要的细胞功能检测实验。

案例展示
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克隆形成
简介

单个细胞在体外增殖6代以上(时间约1周以上),其后代所形成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3 - 1.0mm之间。细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数, 但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖并形成克隆。只有同时具有贴壁和增殖活力的细胞才会形成克隆。

克隆形成率反映细胞的独立生存能力的强弱,用于评价细胞群体依赖性和增殖能力。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强; 二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,直接接种在培养皿中,持续一周以上,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。

特点

克隆形成实验可用于评价不同杀伤因素(药物、基因等)对肿瘤细胞增殖能力或群体依赖性的敏感性,评价细胞在体内成瘤性,癌细胞不一定都可以在体内成瘤,但若体外克隆能力越强,即表明体内成瘤性越强,算是一种模拟体内成瘤的体外实验。

依据采用的培养介质的不同,分为平板克隆和软琼脂克隆两类。

(1)平板克隆形成:细胞培养在培养基中,应用于贴壁的细胞。

将细胞分离成单细胞悬液,在培养皿中接种培养,根据集落形成数量和大小来检测细胞增殖能力和致瘤性。适用于贴壁生长细胞和正常培养的细胞。


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平板克隆形成实验步骤


(2)软琼脂克隆形成:细胞被琼脂糖挂起来,主要应用于悬浮的肿瘤细胞和转化细胞系。

又名非锚定依赖性生长实验,利用软琼脂为培养介质,使细胞在悬浮状态下生长。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖,进而通过软琼脂中形成克隆的能力反映了恶性程度,可用于细胞分化的基础研究和临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。


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吉满生物具有多年的细胞培养、细胞处理以及细胞功能检测的相关经验,可以满足不同处理需要的细胞功能检测实验。

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