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自噬慢病毒
背景介绍


细胞自噬,简单的说就是“吃掉自己”。是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。自噬包括生理条件下的基础型自噬和应激条件下的诱导型自噬。研究表明,自噬能在细胞稳态、衰老、免疫、肿瘤发生及神经退行性疾病等多种生理病理过程中发挥重要作用。


基本原理与LC3标志物




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 自噬原理图



自噬标志物分子LC3,是微管相关蛋白轻链3(MAP1LC3)的简称,它贯穿整个自噬过程,哺乳动物的LC3可分为三种:LC3A、LC3B和LC3C。


自噬发生时,LC3蛋白合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,产生细胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为14kD的LC3-II,并定位到自噬小体中。


LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。


产品列表


吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品,当细胞内没有自噬发生时,荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中,一旦细胞发生自噬活动,荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜,此时在荧光显微镜下可清晰地观察到明亮的荧光斑点,斑点数量的多少就代表了自噬活动的强弱。


吉满自主研发的双荧光自噬慢病毒,可用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。由于自噬溶酶体内的酸性环境,导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱表明溶酶体与自噬小体融合形成了自噬溶酶体。而mRFP是一直稳定表达的,因而可以通过GFP与mRFP的亮点比例来评价自噬流进程。



产品名称产品货号产品规格
pGMLV-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV04-1100ul*5管(1E8TU/mL)
pGMLV-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV04-2100ul*10管(1E8TU/mL)
pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV05-1100ul*5管(1E8TU/mL)
pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)
PGMLV-CMV-TurboRFP-EGFP-H_LC3 LentivirusGM-0220LV07-1100ul*5管(1E8TU/mL)
PGMLV-CMV-TurboRFP-EGFP-H_LC3 LentivirusGM-0220LV07-2100ul*10管(1E8TU/mL)


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自噬慢病毒
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细胞自噬,简单的说就是“吃掉自己”。是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。自噬包括生理条件下的基础型自噬和应激条件下的诱导型自噬。研究表明,自噬能在细胞稳态、衰老、免疫、肿瘤发生及神经退行性疾病等多种生理病理过程中发挥重要作用。


基本原理与LC3标志物




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 自噬原理图



自噬标志物分子LC3,是微管相关蛋白轻链3(MAP1LC3)的简称,它贯穿整个自噬过程,哺乳动物的LC3可分为三种:LC3A、LC3B和LC3C。


自噬发生时,LC3蛋白合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,产生细胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为14kD的LC3-II,并定位到自噬小体中。


LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。


产品列表


吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品,当细胞内没有自噬发生时,荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中,一旦细胞发生自噬活动,荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜,此时在荧光显微镜下可清晰地观察到明亮的荧光斑点,斑点数量的多少就代表了自噬活动的强弱。


吉满自主研发的双荧光自噬慢病毒,可用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。由于自噬溶酶体内的酸性环境,导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱表明溶酶体与自噬小体融合形成了自噬溶酶体。而mRFP是一直稳定表达的,因而可以通过GFP与mRFP的亮点比例来评价自噬流进程。



产品名称产品货号产品规格
pGMLV-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV04-1100ul*5管(1E8TU/mL)
pGMLV-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV04-2100ul*10管(1E8TU/mL)
pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV05-1100ul*5管(1E8TU/mL)
pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro LentivirusGM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)
PGMLV-CMV-TurboRFP-EGFP-H_LC3 LentivirusGM-0220LV07-1100ul*5管(1E8TU/mL)
PGMLV-CMV-TurboRFP-EGFP-H_LC3 LentivirusGM-0220LV07-2100ul*10管(1E8TU/mL)


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