Current position:Technical Service > 细胞系构建服务 > Luciferase标记细胞株
Luciferase标记细胞株
简介

动物活体内光学成像(optical in vivo imaging是基于分子影像学孕育而生的,主要采用生物发光(bioluminescence与化学荧光(fluorescence两种技术在活体动物体内进行生物标记,通过成像系统来观测活体动物体内肿瘤的生长及转移,感染性疾病的发展进程、特定基因的表达等生物学过程。

荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素。荧光素酶在氧气、ATP存在的条件下,给予外源(腹腔或静脉注射)底物荧光素luciferin,即可在几分钟内发生氧化反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),并产生发光现象。此发光现象只有在活细胞内才会产生,并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。在动物体内,光在传播时会被散射和吸收,可见光主要是被血红蛋白吸收,主要吸收的是可见光蓝绿波段;但在大于600 nm的红光波段,血红蛋白的吸收作用比较小,也就是说,大量的光虽然有部分散射但可以透过组织和皮肤而被高灵敏CCD检测到。通过选用适当的CCD镜头、成像暗箱,可由仪器量化检测到光强度,同时反映出细胞的数量。

该项技术操作方便,测量迅速,图像清晰,信噪比低,价格便宜,可精确定量,易于被大多数研究员接受,在动物体内研究方面得到广泛应用。

活体成像.png

荧光素发光反应原理

特点

将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒或病毒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素(通常以荧光素酶钾盐或钠盐的形式),通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

  • 优点:特异性强,灵敏度高,且无自发荧光;能够进行精确定量

  • 缺点:信号较弱,检测时间较长;需要高度灵敏的仪器设备;需要底物


活体成像仪器观察.png

活体成像技术

服务流程
优势

满生物自研多种的荧光素酶(Luciferase, Luc)标记细胞,涵盖常用的细胞类型,每株细胞都经STR或物种检测、荧光素酶功能验证。吉满生物提供的Luciferase稳转细胞株采用慢病毒法构建,除稳定高效地表达荧光素酶外,还具有发光强度高、体内成瘤与成像效果好等优点,可满足活体动物成像和体外分析等多方面的应用需求。

案例展示
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Luciferase标记细胞株
简介

动物活体内光学成像(optical in vivo imaging是基于分子影像学孕育而生的,主要采用生物发光(bioluminescence与化学荧光(fluorescence两种技术在活体动物体内进行生物标记,通过成像系统来观测活体动物体内肿瘤的生长及转移,感染性疾病的发展进程、特定基因的表达等生物学过程。

荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素。荧光素酶在氧气、ATP存在的条件下,给予外源(腹腔或静脉注射)底物荧光素luciferin,即可在几分钟内发生氧化反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),并产生发光现象。此发光现象只有在活细胞内才会产生,并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。在动物体内,光在传播时会被散射和吸收,可见光主要是被血红蛋白吸收,主要吸收的是可见光蓝绿波段;但在大于600 nm的红光波段,血红蛋白的吸收作用比较小,也就是说,大量的光虽然有部分散射但可以透过组织和皮肤而被高灵敏CCD检测到。通过选用适当的CCD镜头、成像暗箱,可由仪器量化检测到光强度,同时反映出细胞的数量。

该项技术操作方便,测量迅速,图像清晰,信噪比低,价格便宜,可精确定量,易于被大多数研究员接受,在动物体内研究方面得到广泛应用。

活体成像.png

荧光素发光反应原理

特点

将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒或病毒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素(通常以荧光素酶钾盐或钠盐的形式),通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

  • 优点:特异性强,灵敏度高,且无自发荧光;能够进行精确定量

  • 缺点:信号较弱,检测时间较长;需要高度灵敏的仪器设备;需要底物


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活体成像技术

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优势

满生物自研多种的荧光素酶(Luciferase, Luc)标记细胞,涵盖常用的细胞类型,每株细胞都经STR或物种检测、荧光素酶功能验证。吉满生物提供的Luciferase稳转细胞株采用慢病毒法构建,除稳定高效地表达荧光素酶外,还具有发光强度高、体内成瘤与成像效果好等优点,可满足活体动物成像和体外分析等多方面的应用需求。

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