动物活体内光学成像(optical in vivo imaging)是基于分子影像学孕育而生的,主要采用生物发光(bioluminescence)与化学荧光(fluorescence)两种技术在活体动物体内进行生物标记,通过成像系统来观测活体动物体内肿瘤的生长及转移,感染性疾病的发展进程、特定基因的表达等生物学过程。
荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素。荧光素酶在氧气、ATP存在的条件下,给予外源(腹腔或静脉注射)底物荧光素(luciferin),即可在几分钟内发生氧化反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),并产生发光现象。此发光现象只有在活细胞内才会产生,并且发光光强度与标记细胞的数目线性相关。在动物体内,光在传播时会被散射和吸收,可见光主要是被血红蛋白吸收,主要吸收的是可见光蓝绿波段;但在大于600 nm的红光波段,血红蛋白的吸收作用比较小,也就是说,大量的光虽然有部分散射但可以透过组织和皮肤而被高灵敏CCD检测到。通过选用适当的CCD镜头、成像暗箱,可由仪器量化检测到光强度,同时反映出细胞的数量。
该项技术操作方便,测量迅速,图像清晰,信噪比低,价格便宜,可精确定量,易于被大多数研究员接受,在动物体内研究方面得到广泛应用。
荧光素发光反应原理