Current position:Technical Service > 报告基因检测 > 转录因子调控/promoter活性研究
转录因子调控/promoter活性研究
简介

转录因子是一类参与基因转录调控的重要调节因子。不同转录因子的DNA结合结构域识别不同基因启动子区特定的碱基序列,行使抑制或激活该基因转录的功能。将目的基因启动子区域(通常取转录起始位点TSS上游-2000bp)、或针对结合位点进行突变、或分段截断序列,构建到报告基因载体luciferase的上游,共转染转录因子过表达质粒,通过荧光素酶活反映转录因子对启动子活性的调控作用。

启动子是基因的一个组成部分,作为基因表达的“开关”,控制基因表达的起始时间和表达的程度。启动子本身并不控制基因活动,而是通过与称为转录因子的这种具有特殊结构的蛋白质结合而控制基因活动的。也就是说启动子是指能启动基因转录的序列,启动子对基因的表达是必须的,如果一个基因要表达,那么它的前面一定要有一段启动子序列,RNA聚合酶等蛋白会结合到启动子上才能开始基因的转录。但真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态,因为RNA聚合酶自身无法启动基因的转录,只有当转录因子结合到其识别的DNA序列上后,基因才开始表达。


pGL3-Basic Map.pngPGL3-Promoter Map.png

常用载体:pGL3-Basic(左) 、pGL3-Promoter(右)

特点

双荧光素酶报告基因检测系统具有如下特点:

(1)灵敏度高、动态范围广、应用灵活;

(2)转录后无需翻译即具有生物活性;

(3)实验中报告基因和对照基因的酶没有种源同源性;

(4)萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物,反应中不存在交叉干扰。


转录因子与启动子研究主要包含:

(1)启动子活性验证:验证转录因子与启动子是否存在相互作用;

(2)转录因子与启动子作用位点研究:通过截短、潜在结合位点突变验证转录因子与启动子的结合位点。


转录因子与启动子.png

转录因子与启动子调控示意图

服务流程
优势

(1)吉满生物可根据客户需求提供实验方案,评估项目可行性,提供一站式服务;

(2)吉满生物具有丰富的分子克隆报告基因检测经验,可快速获得结果,周期较短。

案例展示
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转录因子调控/promoter活性研究
简介

转录因子是一类参与基因转录调控的重要调节因子。不同转录因子的DNA结合结构域识别不同基因启动子区特定的碱基序列,行使抑制或激活该基因转录的功能。将目的基因启动子区域(通常取转录起始位点TSS上游-2000bp)、或针对结合位点进行突变、或分段截断序列,构建到报告基因载体luciferase的上游,共转染转录因子过表达质粒,通过荧光素酶活反映转录因子对启动子活性的调控作用。

启动子是基因的一个组成部分,作为基因表达的“开关”,控制基因表达的起始时间和表达的程度。启动子本身并不控制基因活动,而是通过与称为转录因子的这种具有特殊结构的蛋白质结合而控制基因活动的。也就是说启动子是指能启动基因转录的序列,启动子对基因的表达是必须的,如果一个基因要表达,那么它的前面一定要有一段启动子序列,RNA聚合酶等蛋白会结合到启动子上才能开始基因的转录。但真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态,因为RNA聚合酶自身无法启动基因的转录,只有当转录因子结合到其识别的DNA序列上后,基因才开始表达。


pGL3-Basic Map.pngPGL3-Promoter Map.png

常用载体:pGL3-Basic(左) 、pGL3-Promoter(右)

特点

双荧光素酶报告基因检测系统具有如下特点:

(1)灵敏度高、动态范围广、应用灵活;

(2)转录后无需翻译即具有生物活性;

(3)实验中报告基因和对照基因的酶没有种源同源性;

(4)萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物,反应中不存在交叉干扰。


转录因子与启动子研究主要包含:

(1)启动子活性验证:验证转录因子与启动子是否存在相互作用;

(2)转录因子与启动子作用位点研究:通过截短、潜在结合位点突变验证转录因子与启动子的结合位点。


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(1)吉满生物可根据客户需求提供实验方案,评估项目可行性,提供一站式服务;

(2)吉满生物具有丰富的分子克隆报告基因检测经验,可快速获得结果,周期较短。

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