RNA干扰(RNA interference, RNAi) 是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA存在同源互补序列的双链RNA(double strand RNA, dsRNA) 导入细胞后，能特异性地降解该mRNA，从而产生相应的功能表型缺失。
RNAi提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。现今发现的主要起干扰作用的RNAi主要有两类小分子RNA：一类是microRNA（miRNA）；另一类是siRNA （small interfering RNA）。
siRNA制备的方法一般有：化学合成siRNA，哺乳动物细胞载体shRNA克隆和慢病毒载体shRNA克隆。
将慢病毒载体的shRNA质粒与慢病毒包装辅助质粒和包膜质粒共转染293T细胞，收集上清进行浓缩纯化，获取高滴度的慢病毒，相对于SiRNA和shRNA质粒，shRNA慢病毒的感染范围更广，如依赖转染试剂难转染的细胞：原代细胞、悬浮细胞等，并可实现稳定、长效抑制基因表达。
干扰原理（图片来源：RNA Therapeutics Institute）
