Current position:Technical Service > 质粒构建服务
质粒构建服务
简介

质粒(Plasmid)—— 基因工程中最常见的运载体。是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。绝大多数质粒是闭合环状的双链DNA分子。

质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的质粒。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。

大量获取质粒可以通过质粒扩增的方式,其方法通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌(感受态)中,然后借助大肠杆菌的摇菌扩增实现质粒的扩增,再通过抽提的方式收获大量质粒。质粒扩增需要的源头质粒量非常小,1ug的质粒已经能够满足扩增的需要,这也使得质粒的重复使用变得非常容易,因此质粒发货后无序列问题不退不换。

质粒.png

质粒DNA示意图

特点
稳定且可易扩增
闭合环状双连DNA分子,它很稳定;携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后,在细胞中进行自我复制,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA同步复制。
可瞬转可稳转
可瞬时表达发挥时间短,也可以构建稳转株。可对于易转染的细胞可通过转染试剂侵染细胞,难转染细胞可通过电转的方法;可以瞬时表达,也可以构建稳转株,但耗时长。
容载序列长
经过构建后的普通载体可容纳较长的目的基因。除外源shRNA和较短cDNA片段,普通质粒也可容纳较长cDNA片段,更好的研究上调较长编码基因或非编码基因等后引起的细胞表型变化。
服务流程
优势

(1)吉满生物具有专业的技术研究团队和丰富的分子克隆经验;

(2)吉满生物目前已有多种工具载体可选,应用于各种表达系统;

(3)可根据客户需求构建不同的目的载体。

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质粒构建服务
简介

质粒(Plasmid)—— 基因工程中最常见的运载体。是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。绝大多数质粒是闭合环状的双链DNA分子。

质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的质粒。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。

大量获取质粒可以通过质粒扩增的方式,其方法通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌(感受态)中,然后借助大肠杆菌的摇菌扩增实现质粒的扩增,再通过抽提的方式收获大量质粒。质粒扩增需要的源头质粒量非常小,1ug的质粒已经能够满足扩增的需要,这也使得质粒的重复使用变得非常容易,因此质粒发货后无序列问题不退不换。

质粒.png

质粒DNA示意图

特点
稳定且可易扩增
闭合环状双连DNA分子,它很稳定;携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后,在细胞中进行自我复制,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA同步复制。
可瞬转可稳转
可瞬时表达发挥时间短,也可以构建稳转株。可对于易转染的细胞可通过转染试剂侵染细胞,难转染细胞可通过电转的方法;可以瞬时表达,也可以构建稳转株,但耗时长。
容载序列长
经过构建后的普通载体可容纳较长的目的基因。除外源shRNA和较短cDNA片段,普通质粒也可容纳较长cDNA片段,更好的研究上调较长编码基因或非编码基因等后引起的细胞表型变化。
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优势

(1)吉满生物具有专业的技术研究团队和丰富的分子克隆经验;

(2)吉满生物目前已有多种工具载体可选,应用于各种表达系统;

(3)可根据客户需求构建不同的目的载体。

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